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3D共聚焦顯微鏡的基本原理

 
      3D共聚焦顯微鏡共聚焦顯微成像技術(shù)是一種利用逐點(diǎn)照明和空間針孔調(diào)制來去除樣品非焦點(diǎn)平面的散射光的光學(xué)成像手段,相比于傳統(tǒng)成像方法可以提高光學(xué)分辨率和視覺對比度。
       從一個點(diǎn)光源發(fā)射的探測光通過透鏡聚焦到被觀測物體上,如果物體恰在焦點(diǎn)上,那么反射光通過原透鏡應(yīng)當(dāng)匯聚回到光源,這就是所謂的共聚焦,簡稱共焦。共焦顯微鏡在反射光的光路上加上了一塊半反半透鏡(dichroic mirror),將已經(jīng)通過透鏡的反射光折向其它方向,在其焦點(diǎn)上有一個帶有“針孔”(Pinhole)的擋板,小孔就位于焦點(diǎn)處,擋板后面是一個光電倍增管(photomultiplier tube,PMT)。可以想像,探測光焦點(diǎn)前后的反射光通過這一套共焦系統(tǒng),必不能聚焦到小孔上,會被擋板擋住。于是光度計(jì)測量的就是焦點(diǎn)處的反射光強(qiáng)度。其意義是:通過移動透鏡系統(tǒng)可以對一個半透明的物體進(jìn)行三維掃描。這樣的構(gòu)想,是在1953年,美國學(xué)者馬文·明斯基提出,經(jīng)過了30年的發(fā)展,才利用激光為光源,發(fā)展出符合馬文·明斯基理想的共聚焦顯微鏡。



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